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T4 DNA Ligase T4原理載體及其他

  • 型   號(hào):42017
  • 價(jià)   格:
  • 更新時(shí)間:2025-04-24
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

T4 DNA Ligase 是從表達(dá)T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化而來(lái)的。它催化相鄰DNA鏈的的5’-磷酸末端和3’羥基末端以磷酸二酯鍵結(jié)合反應(yīng)。該酶催化平滑末端或粘性末端DNA的連接,修復(fù)雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口。
T4 DNA Ligase T4原理載體及其他

T4 DNA Ligase


T4 DNA Ligase T4原理載體及其他

目錄號(hào):42017

試劑盒組成、包裝:

組成

50U(42017-50)

100U(42017-100)

300U(42017-300)

T4 DNA ligase

50U

100U

300U

10  Ligation Buffer

40ml

80ml

120ml

濃度: 5U/ml

儲(chǔ)運(yùn)溫度:-20℃(保存6個(gè)月)

制品說(shuō)明:T4 DNA Ligase 是從表達(dá)T4 DNA Ligase 基因的大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)表后分離純化而來(lái)的。它催化相鄰DNA鏈的的5-磷酸末端和3’羥基末端以磷酸二酯鍵結(jié)合反應(yīng)。該酶催化平滑末端或粘性末端DNA的連接,修復(fù)雙鏈DNA、RNA、DNA/RNA雜交中的單鏈中的單鏈切口。

適用范圍:(1DNA片段和載體DNA快速連接;

2)限制酶切片段的克隆;

3)將DNA片段與LinkerAdaptor連接。

酶貯存緩沖液

 20mM Tris-HCl (pH7.5), 0.1 mM EDTA, 1mM DTT, 50 mM KCl, 50% glycerol。

10×Ligation Buffer

400 mM Tris-HCl, 100 mM MgCl2, 100 mM DTT,5 mM ATP(PH7.8),其他成分。

建議連接反應(yīng)體系: ( 10 μl 反應(yīng)體系為例)


標(biāo)準(zhǔn)反應(yīng)管

陽(yáng)性對(duì)照管

Vector

ml

ml

PCR產(chǎn)物

ml **

/

對(duì)照插入DNA片段

/

1ml

T4 DNA連接酶(5U/ml)

25U

25U

10×Ligation Buffer

1ml

1ml

加去離子水至終體積

10ml

10ml

反應(yīng)循環(huán)的設(shè)置

粘端連接:22oC反應(yīng)10分鐘(可根據(jù)需要延長(zhǎng)到1小時(shí));也可以16oC反應(yīng)1-5小時(shí)。

平端連接:22oC反應(yīng)2小時(shí)或16 oC過(guò)夜。

 

 T4 DNA Ligase T4原理載體及其他


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