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產(chǎn)品展示
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lncRNA熒光定量檢測(cè)試劑盒

  • 型   號(hào):71503
  • 價(jià)   格:
  • 更新時(shí)間:2025-04-23
  • 廠家性質(zhì):經(jīng)銷商

與 mRNA 相比,lncRNA 具有豐度低、GC含量差異大、二級(jí)結(jié)構(gòu)更復(fù)雜等特性,傳統(tǒng)定量試劑對(duì) lncRNA 難以達(dá)到理想的效果。本試劑盒中的 2× Universal lncRNA SYBR qPCR Mix是專門為 lncRNA 定量檢測(cè)而研發(fā)的新一代預(yù)混形式的熒光定量 PCR 檢測(cè)試劑,其中的DNA Polymerase 采用的是抗體修飾的熱啟動(dòng)形式
lncRNA熒光定量檢測(cè)試劑盒

lncRNAqPCR Kit (SYBR Green)

lncRNA 熒光定量檢測(cè)試劑盒 (SYBR Green) 


lncRNA熒光定量檢測(cè)試劑盒 

目錄號(hào):71503

產(chǎn)品內(nèi)容

Components

P503-500

500rxns(20μl/rxn)

P503-2500

2500rxns(20μl/rxn)

2x Universal lncRNA SYBR qPCR Mix

1 ml x5

1 ml x25

保存條件

-20℃保存,有效期 24 個(gè)月。使用前,充分融解,輕輕顛倒混勻,短期使用可放在 4 ℃,避免反復(fù)凍融。

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

與 mRNA 相比,lncRNA 具有豐度低、GC含量差異大、二級(jí)結(jié)構(gòu)更復(fù)雜等特性,傳統(tǒng)定量試劑對(duì) lncRNA 難以達(dá)到理想的效果。本試劑盒中的 2× Universal lncRNA SYBR qPCR Mix是專門為 lncRNA 定量檢測(cè)而研發(fā)的新一代預(yù)混形式的熒光定量 PCR 檢測(cè)試劑,其中的DNA Polymerase 采用的是抗體修飾的熱啟動(dòng)形式,確保本產(chǎn)品在保證較高的反應(yīng)特異性的情況下具有更高的檢測(cè)靈敏度。此外,Buffer 中添加了的 H-competitor 因子和 EP 組分,使得本產(chǎn)品具有廣泛的樣本普適性,對(duì)不同GC含量的模板、具有復(fù)雜高級(jí)結(jié)構(gòu)的模板、PCR 抑制劑殘留較多的模板以及長(zhǎng)片段模板等具有非常好的擴(kuò)增適用性,特別適合高級(jí)結(jié)構(gòu)相對(duì)復(fù)雜,整體豐度相對(duì)較低的 lncRNA 的定量檢測(cè)。

預(yù)混液中含有通用型ROX,適用于所有qPCR儀,使用qPCR Mix時(shí)不需要額外添加ROX來校正儀器。

操作步驟:

1. 將DNA模板、引物、2 x Universal lncRNA SYBR qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解并置于冰上備用。

2. 冰上配制qPCR反應(yīng)體系:(以20μl反應(yīng)體系為例)

Components

Volume (20μl)

Final Concentration

2 x Universal lncRNA SYBR qPCR Mix

10 μl

cDNA Template

Variable

As required

Forward Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

Reverse Primer (10μM)

0.4 μl

0.2 μM each

RNase free H2O

Up to 20 μl

Not applicable

注意:

1) 推薦模板加樣量為1-2μl / 20μl反應(yīng)體系,cDNA原液≤總反應(yīng)體系的10%。因不同種類的DNA模板中含有的靶基因拷貝數(shù)不同,可對(duì)模板進(jìn)行梯度稀釋,以確定最佳的模板使用量。

2) 通常推薦引物濃度為0.2 μM,就可以得到較好的結(jié)果,反應(yīng)效果不佳時(shí)可在0.1 - 1.0 μM范圍內(nèi)進(jìn)行調(diào)整。

擴(kuò)增效率不高的情況下,可提高引物濃度;發(fā)生非特異性反應(yīng)時(shí),可降低引物濃度,由此優(yōu)化反應(yīng)體系。

3. qPCR反應(yīng)程序

注意:

1) 本產(chǎn)品兼容性強(qiáng),絕大多數(shù)情況下使用二步法和三步法均可獲得良好效果。一般來說,二步法擴(kuò)增特異性高,三步法擴(kuò)增效率高。如果融鏈曲線較差,可以嘗試兩步法擴(kuò)增或提高退火溫度;如果因使用Tm 值較低的引物等原因,得不到良好的實(shí)驗(yàn)結(jié)果時(shí),可嘗試加長(zhǎng)延伸時(shí)間或者進(jìn)行三步法PCR擴(kuò)增。

2) 根據(jù)引物的Tm值進(jìn)行退火&延伸(退火)溫度的設(shè)定;

3) 延伸(退火&延伸)時(shí)間的設(shè)置還需要根據(jù)您所使用的qPCR儀所需要的最短數(shù)據(jù)采集時(shí)間自行調(diào)整。

4) 融解曲線分析請(qǐng)以所使用的熒光定量PCR儀推薦的程序進(jìn)行設(shè)定。

相關(guān)產(chǎn)品:

71500-100 Script III lncRNA cDNA Synthesis Kit(with dsDNase)

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lncRNA熒光定量檢測(cè)試劑盒 

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