病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒 II
采用特異性結(jié)合病毒DNA/RNA 的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),病毒DNA/RNA提取試劑盒適合于從無(wú)細(xì)胞體液,包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細(xì)胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA/RNA。病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒 II
病毒基因組DNA RNA快速提取試劑盒 II
病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒 II
目錄號(hào):91212
v 試劑盒組成、儲(chǔ)存、穩(wěn)定性:
試劑盒組成 | 保存 | 50次(91212-50) |
裂解液VLB | 室溫 | 20ml |
去蛋白液RE | 室溫 | 25ml |
漂洗液RW | 室溫 | 10ml |
第一次使用前按說(shuō)明加指ding量乙醇 | ||
RNase-free H2O | 室溫 | 10ml |
RNase-free 吸附柱RA和收集管 | 室溫 | 50套 |
室溫儲(chǔ)存12個(gè)月不影響使用效果, 各溶液使用后應(yīng)及時(shí)蓋緊蓋子。
v 產(chǎn)品介紹:
采用特異性結(jié)合病毒DNA/RNA 的離心吸附柱和du特的緩沖液系統(tǒng),病毒DNA/RNA提取試劑盒適合于從無(wú)細(xì)胞體液,包括血漿、血清、腹水、培養(yǎng)細(xì)胞上清液、腦脊髓液及尿液等中快速提取高純的病毒DNA/RNA。該產(chǎn)品可以滿足絕大多數(shù)的病毒RNA/DNA的同時(shí)提取要求, 如病毒RNA:HCV(丙肝病毒),HIV(艾滋病毒),和HTLV(人類(lèi)嗜T淋巴細(xì)胞病毒); 病毒DNA:HBV(乙肝病毒)和CMV(巨細(xì)胞病毒)等等。病毒裂解后,DNA/RNA后在高離序鹽狀態(tài)下選擇性吸附于離心柱內(nèi)硅基質(zhì)膜,再通過(guò)一系列快速的漂洗-離心的步驟,將鹽、細(xì)胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)去除,最后低鹽的洗脫緩沖液將純凈的病毒DNA/RNA從硅基質(zhì)膜上洗脫。純化后的病毒核酸無(wú)雜質(zhì)和PCR抑制劑,可直接適用于PCR/RT-PCR分析。
具體產(chǎn)品的參數(shù)以收到產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)的參數(shù)為準(zhǔn)
v 產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 不需要使用有毒的苯fen等試劑,也不需要乙醇沉淀等步驟。
2. 節(jié)省時(shí)間,簡(jiǎn)捷,單個(gè)樣品操作一般可在20分鐘內(nèi)完成。
3. 多次柱漂洗確保高純度,提取的病毒DNA/RNA 純度高,質(zhì)量穩(wěn)定可靠,可適用于各種常規(guī)操作,包括PCR/RT-PCR、酶切、測(cè)序、Southern 雜交等。
v 操作步驟:(實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)先閱讀注意事項(xiàng))
提示:第一次使用前請(qǐng)先在10ml漂洗液RW中加入40ml無(wú)水乙醇,充分混勻,加入后請(qǐng)及時(shí)在方框打鉤標(biāo)記已加入乙醇,以免多次加入!
1. 200μl血清等體液(需回復(fù)到室溫,不足可用0.9% NaCl或者PBS補(bǔ)足)轉(zhuǎn)入上述1.5ml離心管,加入400μl 裂解液VLB, 立刻渦旋振蕩充分混勻。
2. 室溫(15-25℃)放置10分鐘,每隔5分鐘,振蕩混勻一次。
3. 加入450μl無(wú)水乙醇,立刻渦旋振蕩充分混勻。
如果周?chē)h(huán)境高于25℃,乙醇需要冰上預(yù)冷后再加入。
4. 將上述混合物加入一個(gè)吸附柱RA中,(吸附柱放入收集管中)13,000rpm離心30-60秒,倒掉收集管中的廢液。
如果總體積超過(guò)750μl,可分兩次將溶液加入同一個(gè)吸附柱RA中。
5. 加500μl去蛋白液RE,12,000rpm離心30秒,棄廢液。
6. 加入500μl漂洗液RW(請(qǐng)先檢查是否已加入無(wú)水乙醇!),12,000rpm 離心30秒,棄廢液,加入500μl漂洗液RW,重復(fù)一遍。
7. 將吸附柱RA放回空收集管中,13,000rpm離心2分鐘,盡量除去漂洗液, 以免漂洗液中殘留乙醇抑制下游反應(yīng)。
8. 取出吸附柱RA,放入一個(gè)RNase free的離心管中,在吸附膜的中間部位加30-50μl RNase free H20(事先在 65-70℃水浴中加熱效果更好),室溫放置1分鐘,12,000rpm 離心1分鐘。如果想得到較多量的DNA,可將得到的溶液重新加入離心吸附柱中,12,000rpm離心1分鐘。
洗脫體積越大,洗脫效率越高。如果需要DNA/RNA濃度較高,可以適當(dāng)減少洗脫體積, 但是最小體積不應(yīng)少于20μl,體積過(guò)小降低洗脫效率,減少DNA/RNA產(chǎn)量。
9. DNA病毒可以存放在2-8℃,如果要長(zhǎng)時(shí)間存放,可以放置在-20℃。RNA病毒建議最好立刻使用,否則立刻短期放置在-70℃?zhèn)溆谩?/span>
病毒基因組DNA/RNA快速提取試劑盒 II