RNA病毒基因組提取試劑盒 NobleRyder R0903
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RNA病毒基因組提取試劑盒 NobleRyder R0903
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RNA/DNA病毒基因組提取試劑盒
試劑盒組成 | 50T | 100T | 保存溫度 |
蛋白酶K(10mg/ml) | 1ml | 2ml | -20℃ |
結(jié)合液 | 25ml | 50ml | RT |
漂洗液(RNase free) | 15ml | 15ml×2 | 2-8℃ |
玻璃奶 | 1.25ml | 2.5ml | 2-8℃ |
洗脫緩沖液(RNase free) | 10ml | 10ml | 2-8℃ |
原理簡介
本試劑盒適合于從血清、細胞上清、淋巴液中提取RNA病毒基因組,也可用于DNA病毒基因組的提取。本試劑盒利用蛋白酶K破開病毒外殼,放出RNA/DNA,用玻璃奶吸附達到純化目的。
使用本試劑盒提取的RNA/DNA可用于各種常規(guī)操作,包括RT-PCR、文庫構(gòu)建、Southern雜交等實驗。
注意事項
1.一般病毒含量過低,zui后提取的基因組RNA/DNA電泳無法檢測到,但RT-PCR/PCR等其他實驗還會有結(jié)果。
2.同一樣本,如果想大量提取,可以增加樣本量,并且每一步試劑加量,但使用次數(shù)會成倍減少。
3. 所有離心步驟用低溫離心機在4℃條件下離心,如果實驗室沒有低溫離心機,也可以使用常溫離心機,但所提得的RNA可能會降解嚴重些。
操作步驟
準備工作:使用前請先開啟一瓶新的無水乙醇,倒入漂洗液中,倒?jié)M至離瓶口約0.5-1ml,蓋上瓶口,搖勻。
1、 取病毒上清液0.5ml,12000rpm離心5min,盡量取上清使用,棄去沉淀。
2、 向病毒上清中加入20ul 10mg/ml的蛋白酶K,充分混勻,65℃消化10-20min,期間可顛倒離心管混勻數(shù)次。
3、 向管中加入500ul結(jié)合液,充分混勻。
4.玻璃奶搖勻。加入25ul搖勻的玻璃奶,混勻,室溫放置2分鐘,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清;沉淀加入800ul漂洗液,振蕩混勻,10000轉(zhuǎn)/分鐘離心1分鐘,去上清,再用600ul漂洗液洗一次。去上清,再次離心2分鐘,用小吸頭吸去上清。
7.室溫放置10分鐘,加入30-50ul洗脫緩沖液混勻溶解,靜置5分鐘。離心,取上清為所提RNA。
北京諾博萊德科技有限公司位于北京市海淀區(qū),是一家專業(yè)從事生化試劑、分子生物學試劑、實驗耗材及實驗儀器研發(fā)、銷售、服務(wù)為一體的生物科技公司,公司主要經(jīng)營的進口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;產(chǎn)品涉及化工原料、生化試劑、分子克隆相關(guān)試劑、細胞培養(yǎng)及檢測常用試劑、實驗室常用耗材及儀器。
RNA病毒基因組提取試劑盒 NobleRyder R0903